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美國Cytoskeleton公司自1993年成立以來,不斷擴(kuò)大產(chǎn)品線,為藥物開發(fā)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞骨架方面的研究提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。該公司專著于生產(chǎn)純化蛋白和使用方便的試劑盒,用于研究生化和細(xì)胞信號(hào)過程。G-LISATM系列試劑盒用ELISA為基礎(chǔ)的方法在3小時(shí)之內(nèi)快捷準(zhǔn)確地測定小G蛋白的活性。
G-LISATM試劑盒
近幾年,測定細(xì)胞或組織中的小G蛋白的活性已經(jīng)成為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究者廣泛應(yīng)用的技術(shù)。傳統(tǒng)的pulldown方法是一種非常有用的方法,但是它有許多缺點(diǎn),例如,費(fèi)時(shí),需要大量的細(xì)胞材料等。為此,Cytoskeleton公司開發(fā)了一種革新的G-LISATM檢測試劑盒。使用G-LISA試劑盒檢測Rho, Rac,你現(xiàn)在可以在3小時(shí)之內(nèi)檢測細(xì)胞和組織樣品中的Rho或Rac的活性。G-LISA試劑盒可以采用光吸收法和自發(fā)光法兩種檢測形式。它僅需要傳統(tǒng)pulldown方法的1-5%細(xì)胞材料。G-LISA試劑盒可以應(yīng)用于高通量的藥物開發(fā)。這類試劑盒的背景信號(hào)值為4-6。
G-LISA試劑盒把Rho(Rac)-GTP-binding domain共價(jià)地連接在96孔板上。裂解物中的有活性的GTP-bound Rho(Rac)結(jié)合在孔中,同時(shí)無活性的GDP-bound Rho(Rac)被洗掉。然后用Rho(Rac)抗體檢測有活性的Rho(Rac)。包被的96孔板是可拆的,所以一個(gè)試劑盒可以檢測多個(gè)不同的樣品,不會(huì)污染。