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當前位置:首頁產品中心DiacloneELISA Kit人白介素6 ELISA試劑盒

人白介素6 ELISA試劑盒
產品簡介:

中文名稱人白介素6 ELISA試劑盒
英文名稱Human cytochrome C ELISA ELISA Kit
樣本血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清
檢測范圍6.25Pg/ml-200Pg/ml
靈敏度2pg/ml
規(guī)格48T/96T/2X96T

產品型號:

更新時間:2024-10-11

廠商性質:代理商

訪問量:673

服務熱線

01084640949

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產品介紹

人白介素6 ELISA試劑盒

用途人IL-6 ELISA試劑盒用于體外定量檢測人血清,血漿,緩沖液或細胞培養(yǎng)液中的白介素6。此試劑盒只用于科研,不能用于診斷。

檢測原理:

IL-6試劑盒應用的是夾心法固相酶聯免疫吸附分析法(ELISA)。IL-6特異單克隆抗體被包被于微孔板上,已知IL-6濃度的標準品和未知濃度的樣品可在此反應孔中進行檢測。先將IL-6抗原和生物素標記IL-6特異單克隆抗體同時孵育。洗滌后加入親和素過氧化物酶,孵育后洗去未結合的酶。其后加入底物,產生顏色反應,顏色的深淺與樣品中IL-6的濃度成一定的比例關系。


試劑盒組成及配制:

 

試劑(2-8保存)

1x96孔的配置

產品編號:#950.030.096

 

配制

96T微孔板

1

即用型(已包被)

塑料板蓋

2


標準品:200pg/ml

2

按瓶上的說明稀釋(見試劑制備)

標準品稀釋緩沖液(Buffer

1瓶(25ml

10x濃度,用純水稀釋。(見試劑制備)

標準品稀釋液液(Human   serum

1瓶(7ml

即用型

對照

2

按瓶上的說明稀釋(見試劑制備)

生物素標記IL-6抗體

1(0.4ml)

用生物素標記抗體稀釋液稀釋(見試劑制備)

生物素標記抗體稀釋液

1(7ml)

即用型

親和素-HRP

2(5ul)

0.5ml HRP稀釋液預稀釋(見試劑制備,)

HRP稀釋液

1(23ml)

即用型

洗滌緩沖液

1(10ml)

200x,蒸餾水稀釋(見試劑制備)

TMB

1(11ml)

即用型

H2SO4終止液

1(11ml)

即用型

 自備材料:

蒸餾水;加樣器:10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 1000ul; 漩渦振蕩器和磁力攪拌器

保存條件:

試劑盒保存于2-8度,

 

樣品收集,處理和保存:

1.       細胞培養(yǎng)上清:1000xg離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

2.       血清——操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000xg離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

3.       EDTA,檸檬酸鹽和肝素血漿可用于檢測。1000Xg離心30分鐘去除顆粒。

4.       如果樣品不直接使用,將其分為小部分(250-500ul-70下保存,避免反復凍融。

如果可能,不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的顆粒,檢測前先離心或過濾。

注意:不要在3756加熱解凍。在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍

檢測程序

使用前,將所有試劑充分混合,不要使液體產生泡沫。根據樣品數量加上空白,標準品決定所需的板條,每個樣品,標準品,空白和質控都應做雙份。

詳細步驟

1

制備標準曲線

2

按實驗方案在對應孔加入100ul標準品和樣本,標準品,對照及空白(選擇合適的標準品稀釋液)所有孔均做復孔。

3

加入50ul稀釋后的生物素標記的IL-6抗體到各孔

4

用塑料膜封板,室溫(18-25)孵育1小時

5

去掉封板膜,按以下程序洗板:

a.  吸出孔內液體。

b.  每孔加入300ul1X的洗滌緩沖液

c.  吸出孔內液體

d.  重復步驟bc兩次

6

加入100ul親和素-HRP溶液到各孔

7

用封板膜,封板,室溫(18-25)孵育30min

8

重復步驟5

9

加入100ul即用型TMB底物溶液至各孔

10

室溫避光孵育12-15min,用鋁箔包住反應板,   避免光照。

11

加入100ul   H2SO4終止液到各孔,終止反應。

在分光光度計中讀取結果。450nm作為初始波長,620nm作為參考波長。





更多產品詳情,請聯系Diaclone 中國區(qū)總代理北京博蕾德生物科技有限公司。

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